作者：舒涛,丁彦,肖丽霞,谢斌辉

单位：

1.赣南医学院第一附属医院消化科2.赣南医学院第一附属医院呼吸科3.赣南医学院第一附属医院内分泌科4.赣南医学院第一附属医院普外科

关键词：

病毒,乙型肝炎; 微RNAs; MicroRNA-21基因; 肝细胞株;

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DOI：

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摘要：

目的探讨稳定表达乙型肝炎病毒X(HBVX)和MicroRNA-21基因肝细胞株的构建方法。方法应用LE培养基对大鼠肝细胞株进行培养,将pcDNA 3.1-HBVX质粒中的HBVX序列作为实验模板,采用PCR法对获得的目的基因HBVX片段进行扩增,构建稳定表达的HBVX和MicroRNA-21基因肝细胞株。PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后观察HBVX基因克隆结果,鉴定pcDNA 3.1(+)/HBVX重组质粒和MicroRNA-21质粒。结果 PCR产物HBVX基因片段中存在全部HBVX基因编码序列;RT-PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后可见长度为300 bp的MicroRNA-21前体片段。结论本研究成功构建了稳定表达HBVX和MicroRNA-21基因肝细胞株,为临床进行深入研究提供了实验基础。

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